產品介紹
NcmBlot blocking buffer（快速封閉液）是一種即用型，高效快速應用于 Western Blot 等實驗的封閉液。封閉 時間僅需 10 分鐘，效果優于脫脂奶粉、BSA、酪蛋白等傳統封閉液，獲得更高的信號，更低的背景值，信噪 比高。該試劑不含有哺乳動物來源的蛋白成分，避免與抗體發生交叉反應，適用于磷酸化的抗體，但不可用 于生物素標記的抗體。
產品特色
? 即用型封閉液，無需配制 ? 封閉時間短，僅需 10 分鐘 ? 背景低，信噪比高，優于常規奶粉等封閉的效果 ? 不含哺乳動物來源的蛋白，適用于磷酸化的抗體
操作步驟
1. 完成轉膜后，將膜移入到平皿或者其他適合的容器中（可以不洗滌膜）。 2. 根據膜的大小，加入適量體積的 NcmBlot Blocking Buffer 封閉液，需完全浸沒覆蓋膜，對于 7.5x 8cm 的膜推薦使用量 5-10ml。 3. 置于水平搖床上，室溫條件下振蕩孵育 10 分鐘。 4. 取出封閉完成的膜，用洗滌液沖洗蛋白膜 2-3 次，即可用于一抗孵育等后續 western blot 實驗。
保存條件
4℃保存，冰袋運輸，至少 1 年有效；
注意事項
1. 通常用于 PVDF 膜或 NC 膜的封閉時間為 10 分鐘。對于背景低的抗體，可以縮短到 5 分鐘，而對于一些背景 非常高的抗體，可以嘗試將封閉時間延長為 30-60 分鐘。 2. 沒有任何一種封閉液是適用于所有實驗體系的，因此對于一些特殊的實驗或抗體，可能需要具體情況考慮使 用其它更合適的封閉液，比如奶粉、BSA 等封閉試劑。 3. 信號弱或者無信號：有可能是上樣量不足；轉膜效率低；抗體效價低，特異性差等原因造成，需要根據實驗 情況進行調整 4. 背景高：有可能是抗體使用量過多；蛋白膜洗滌時間不足；抗體和封閉液發生交叉反應；試劑或儀器設備被 污染等原因造成，需要根據實驗具體情況進行調整。 5. 本產品僅限于科研使用，實驗時請穿實驗服并戴一次性手套操作。
